HOME>免疫機能制御学（医動物）>ソーティング支援 　 　   　免疫機能制御学教室では、gCOEの教室を対象に、坂本キャンパス内遺伝子実験施設３Fに設置してあるFACS Aria IIによるセルソーティング支援を行います。手順は以下の通りです。依頼者が学生の場合は、必ず指導教員が同伴してください。 ■ 料金について 　初回のソーティングは、「試験的に、希望の細胞集団を至適な精製度で分取できるのか、やってみたい」という場合が多いことを考え、無料でソーティングを行います。 　その結果、引き続きソーティングを希望する場合は、遺伝子実験施設の規則に従って、施設利用登録申請を行ってください。２回目以降のソーティングは支援員が、依頼者の名前で予約、機器利用を行います。利用料金は、遺伝子実験施設から依頼者が在籍する教室に請求されます。 では、以下にソーティングの流れを説明します。 サンプルの初回のソーティングの場合 １週間前までにメールで支援員までお知らせください。 mailto:cell_sorting@ml.nagasaki-u.ac.jp （支援員：増本雅恵　ますもとまさえ） 分取方法、実施時期等について、依頼者、支援員の間で事前の打ち合わせを行います。以前、同じサンプルをフローサイトメーターで解析したデータがあれば、お持ちいただくと分取方法や細胞の標識方法を決める際に非常に参考になります。この際、機器の予約も行います。 その後、速やかに依頼書をメールで支援員まで提出してください。学生の方は当日、連絡のつく指導教員の連絡先を必ず記入してください。依頼書の受け取りの確認のため、依頼者（依頼者が学生の場合は、指導教員にも）へ依頼内容のメールを送ります。 当日は、細胞の調整や抗体による標識等は依頼者に行っていただきます。依頼者は細胞を標識した後、PBSにて細胞浮遊液を作り（おおよそ5X106/ml ~ 2X107/ml）、坂本キャンパス内遺伝子実験施設３F画像解析室のFACS Aria IIの所までお持ちください。その際、細胞回収用のチューブ（チューブ『Falcon 2063をお勧めします』に培養液1-2mlを入れてください）も多めにお持ちください。遺伝子実験施設のカードキーをお持ちでない方は、２F受付にて貸し出しをしてもらってください。 細胞濃度および総細胞数を支援員にお知らせいただき、始めに、測定条件および分取条件を依頼者と支援者と共同で行います。条件が決まった後の細胞分取は支援員が行います。 ソーティング終了時には、こちらからご連絡いたします。お渡しするものは、分取した細胞が浮遊した分取用チューブと測定データ、印刷した解析結果です。測定データを取り込むUSBメモリをお持ちください。このデータはFCSファイルですので、Diva、CellQuest、FlowJoなどで解析が行えます。 以前に同じサンプルでソーティングを 依頼したことがある場合 メールで支援員までお知らせください。 mailto:cell_sorting@ml.nagasaki-u.ac.jp （支援員：増本雅恵　ますもとまさえ） 一番新しいソーティングの実験日時をお知らせください。希望する実験日時など支援員と相談してください。支援員が機器の予約を行い、依頼者に連絡いたします。 実験日が決まったら、速やかに依頼書をメールで支援員まで提出してください。学生の方は当日、連絡のつく指導教員の連絡先を必ず記入してください。依頼書の受け取りの確認のため、依頼者（依頼者が学生の場合は、指導教員にも）へ依頼内容のメールを送ります。 当日は、細胞の調整や抗体による標識等は依頼者に行っていただきます。依頼者は細胞を標識した後、PBSにて細胞浮遊液を作り、坂本キャンパス内遺伝子実験施設３F画像解析室のFACS Aria IIの所までお持ちください。その際、細胞回収用のチューブも多めにお持ちください。遺伝子実験施設のカードキーをお持ちでない方は、２F受付にて貸し出しをしてもらってください。 細胞濃度および総細胞数を支援員にお知らせいただき、始めに、測定条件および分取条件を依頼者と支援者と共同で行います。条件が決まった後の細胞分取は支援員が行います。 ソーティング終了時には、こちらからご連絡いたします。お渡しするものは、分取した細胞が浮遊した分取用チューブと測定データ、印刷した解析結果です。測定データを取り込むUSBメモリをお持ちください。このデータはFCSファイルですので、Diva、CellQuest、FlowJoなどで解析が行えます。 ● FACS AriaIIによるセルソーティング依頼書 (日本語) ● Sorting Application (英語) なお、ご不明の点がございましたら、 免疫機能制御学教室　医学部基礎棟７階 095-819-7072あるいは7071、内線でしたら7072あるいは7071 　増本　雅恵 （ますもと　まさえ） 　本間　季里 （ほんま　きり） までお問い合わせください。 Copyright© 2004-2010 Department of Molecular Microbiology and Immunology, Nagasaki University Graduate School of Biomedical Sciences All Rights Reserved.